細(xì)胞活性測定方法
2.XTT法
XTT:化學(xué)名:2,3- bis(2-methoxy-4-nitro-5- sulfophenyl)-5-[(phenylamino)carbonyl]
-2H-tetrazolium hydroxide,作為線粒體脫氫酶的作用底物,被活細(xì)胞還原成水溶性的橙黃色甲 產(chǎn)物。當(dāng)XTT與電子偶合劑(例如 PMS)聯(lián)合應(yīng)用時,其所產(chǎn)生的水溶性的甲 產(chǎn)物的吸光度與活細(xì)胞的數(shù)量成正比。
優(yōu)點:1、使用方便,省去了洗滌細(xì)胞;2、檢測快速;3、靈敏度高,甚至可以測定較低細(xì)胞密度;4、重復(fù)性優(yōu)于MTT。
缺點:XTT水溶液不穩(wěn)定,需要低溫保存或現(xiàn)配現(xiàn)用。
三種方法的比較
| MTT法 | XTT法 | CCK-8法(WST-8法) |
甲臜物水溶性 | 難溶性 | 水溶性 | 水溶性 |
檢測波長 | 490 nm | 450nm | 450nm |
性狀 | 粉末 | 2瓶溶液 | 1瓶溶液 |
使用方法 | 配成溶液后使用 | 現(xiàn)配現(xiàn)用 | 毋需預(yù)制 |
使用有機溶劑 | DMSO或其它溶劑 | — | — |
方便性 | + | ++ | +++ |
檢測速度 | + | ++ | +++ |
重復(fù)性 | + | ++ | ++ |
穩(wěn)定性 | ++ | + | ++ |
工作量 | --- | -- | - |
對細(xì)胞毒性 | --- | -- | - |
對人體毒性 | --- | - | - |
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