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技術文章

Technical articles

2023
3-27

ELISA試劑盒實驗靈敏度高的原因
ELISA試劑盒試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在臨床上得到了廣泛的應用，但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大，如不注意，有可能導致顯色不全、花板等結果。我將操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下，以期給同行帶來一些啟發，提高試驗質量。ELISA試劑盒試驗操作中可能影響結果的原因及解決辦法分析：1選擇試劑選擇質量優良的檢測試劑，嚴格按照試劑說明書進行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。2加樣可能原因：1）血清或血漿標本分離不好即進行加樣；2）手工操...
2023
3-20

ELISA實驗出現異常的原因分析
ELISA實驗是我們大家最常見的實驗,也是比較容易出問題的實驗,可能你一不小心,你的整個實驗便是無功能重來那!所以小編給您講解在使用ELISA試劑盒做實驗的時候，有些細節若是做不好會出現實驗異常，或者效果不佳，那么你有想過是什么原因嗎？一、白板異常：顯色步驟結束后，酶標板所有孔均無顏色。陽性對照不顯色。1.試劑已過效期，或不同試劑盒組分混用（解決方式：檢查試劑的組分及批號，確認未過期以及所有組分均屬對應的試劑盒。不同試劑盒或不同批號的試劑不能混用）。2.錯加、漏加試劑底物、顯...
2023
3-13

綿羊I型膠原α1鏈(COL1A1)ELISA試劑盒使用說明書
本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍：96T0.2μg/L-9μg/L使用目的：本試劑盒用于測定綿羊血清、血漿及相關液體樣本中I型膠原α1鏈(COL1A1)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中綿羊I型膠原α1鏈(COL1A1)水平。用純化的綿羊I型膠原α1鏈(COL1A1)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入I型膠原α1鏈(COL1A1)，再與HRP標記的I型膠原α1鏈(COL1A1)抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過che底洗滌后加底物...
2023
3-6

ELISA實驗結果為什么有時候會復測？
在ELISA實驗過程中時常會出現復測現象即我們時常說的"花板"現象，這種現象影響檢驗結果的正確判讀，對工作造成一定的不利影響，一旦出現“花板”，實驗結果必須放棄，重新進行，不僅浪費物料和時間，而且還會出現樣本量缺少、交叉污染、報告延遲等一系列問題。影響因素分析如下：一、標本因素正確處理標本，防止大規模溶血、血漿層異物、使用一次性加樣槍頭，防止交叉污染。血清和血漿均可以用于檢測，但血清的分離應在抽血后等血液wan全凝固后再離心。二、試劑因素正確保存及使用有效試劑。使用過期試劑及...
2023
2-27

競爭法ELISA中，主要兩種計算方法
在競爭法ELISA中，陰性孔呈色深于陽性孔。陰性呈色的強度取決于反應中酶結合物的濃度和加入競爭抑制物的量，一般調節陰性對照的吸光度在1.0-1.5之間，此時反應最為敏感。競爭法ELISA不易用自視判斷結果，因肉眼很難辨別弱陽性反應與陰性對照的顯色差異，一般均用比色計測定，讀出S、P和N的吸光值。計算方法主要也有兩種，即陽性判定值法和抑制率法。a.陽性判定值法與間接法和夾心法中的陽性判定值法基本相同，ELISA試劑盒但在計算公式中引入陽性對照A值，現舉某種檢測抗HBc的試劑盒為...
2023
2-20

豬免疫球蛋白G2（IgG2）ELISA試劑盒說明書
本試劑盒僅供研究使用。使用目的：本試劑盒用于測定豬血清、血漿及相關液體樣本中免疫球蛋白G2（IgG2）含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗原夾心法測定標本中豬免疫球蛋白G2（IgG2）水平。用純化的抗原包被微孔板，制成固相抗原，往包被的微孔中依次加入免疫球蛋白G2（IgG2），再與HRP標記的抗原結合，形成抗原-抗體-酶標抗原復合物，經過che底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的免疫球蛋白G2（IgG2）...
2023
2-13

ELISA測定的常用模式--競爭法測抗原
大分子抗原因其具有兩個以上的抗原決定簇，而可用雙抗體夾心法測定，小分子半抗原如di高辛、茶堿等藥物以及T3，T4及睪酮等激素因其只有一個抗原決定簇，從而無法使用雙抗夾心方法測定，只能采用競爭抑制法測定。具體步驟如下：1．先用抗小分子的特異抗體如雙抗體夾心法一樣包被固相并封閉。2．同時加入待測樣本和酶標的小分子，溫育一定時間后洗板；此步中，待測樣本的小分子將與酶標小分子競爭與固相上特異抗體結合。3．加入酶底物，溫育顯色測定，顯色的強弱與待測樣本中的小分子含量成反比。這種測定模式...
2023
2-6

雙抗夾心 ELISA試劑盒的反應時間
在保證ELISA有效檢測病原菌的前提下，快速、方便也是雙抗夾心ELISA的必要條件。雙抗夾心ELISA從加入待測抗原到得出結果，檢測大腸桿菌O157:H7共需要5h左右，而間接ELISA則需要7h(包被37℃，2h)或者17h(包被4℃guo夜)。本論文篩選出的雙抗夾心ELISA檢測大腸桿菌O157:H7省去封閉這一步驟。在間接ELISA測定抗原中，封閉一般是bi不可少的，因為包被不同濃度抗原不一定可以wan全覆蓋固相載體表面，如果不封閉，很可能使隨后加入的特異性抗體和酶標二...

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