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技術(shù)文章

Technical articles

2014
9-25

小牛血清使用注意事項(xiàng)以及正確的凍存方法
使用小牛血清時的注意事項(xiàng)具體如下：1.供血的新生小牛必須是健康牛的產(chǎn)仔，并在產(chǎn)后24小時內(nèi)抽血，此期間不得吸取母乳。2.以無菌操作自頸動脈放血，并在無菌條件下分離血清及濾菌，全過程在36小時內(nèi)完成。經(jīng)濾菌的血清登一20IC保存。3.血清使用前需做細(xì)蔭、支原體培養(yǎng)及內(nèi)毒素測定，在確實(shí)無污染的情況下方可使用。4.每批小牛血清測定總蛋白含量并分別配成10%,20%,25%于墓礎(chǔ)培養(yǎng)墓和HAT培養(yǎng)墓中，對骨髓瘤細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，觀察小牛血清對瘤細(xì)胞和融合細(xì)胞的細(xì)胞毒性。若在2...
2014
9-23

根據(jù)歷史起源來談“植物組織培養(yǎng)應(yīng)用前景”
19世紀(jì)30年代，德國植物學(xué)施萊登和德國動物學(xué)家施旺創(chuàng)立了細(xì)胞學(xué)說，根據(jù)這一學(xué)說，如果給細(xì)胞提供和生物體內(nèi)一樣的條件，每個細(xì)胞都應(yīng)該能夠獨(dú)立生活；1902年，德國植物學(xué)家哈伯蘭特細(xì)胞性的理論是植物組培的理論基礎(chǔ)。1958年，一個振奮人心的消息從美國傳向世界各地，美國植物學(xué)家斯蒂瓦特等人，用胡蘿卜的嫩皮的細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，終于得到了完整植株，并且這一植株能夠開花結(jié)果，證實(shí)了哈伯蘭特在五十多年前關(guān)于細(xì)胞的預(yù)言。植物組培的簡單過程如下：剪接植物器官或組織——經(jīng)過脫分化（也叫去分化）形成...
2014
9-23

根據(jù)歷史起源來談“植物組織培養(yǎng)應(yīng)用前景
19世紀(jì)30年代，德國植物學(xué)施萊登和德國動物學(xué)家施旺創(chuàng)立了細(xì)胞學(xué)說，根據(jù)這一學(xué)說，如果給細(xì)胞提供和生物體內(nèi)一樣的條件，每個細(xì)胞都應(yīng)該能夠獨(dú)立生活；1902年，德國植物學(xué)家哈伯蘭特細(xì)胞性的理論是植物組培的理論基礎(chǔ)。1958年，一個振奮人心的消息從美國傳向世界各地，美國植物學(xué)家斯蒂瓦特等人，用胡蘿卜的嫩皮的細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，終于得到了完整植株，并且這一植株能夠開花結(jié)果，證實(shí)了哈伯蘭特在五十多年前關(guān)于細(xì)胞的預(yù)言。植物組培的簡單過程如下：剪接植物器官或組織——經(jīng)過脫分化（也叫去分化）形成...
2014
9-16

ELISA法細(xì)胞凋亡檢測操作步驟
細(xì)胞凋亡的發(fā)生是由于鈣-鎂依賴性核酸酶進(jìn)入核小體間切割DNA,產(chǎn)生180bp～200bp或其倍數(shù)的核小體片段。而核小體由于與組蛋白H2A、H2B、H3和H4形成緊密復(fù)合物而不被核酸內(nèi)切酶切割。采用雙抗體夾心酶免疫法，應(yīng)用小鼠抗DNA和抗組蛋白的單克隆抗體，與核小體片段形成夾心結(jié)構(gòu)，可特異性檢測細(xì)胞溶解物中的核小體片段。常見樣本以及基本操作方法：1.收集細(xì)胞，離心后，用200µl溶細(xì)胞緩沖液重新懸浮，室溫下作用30min。（培養(yǎng)細(xì)胞的上清液、血漿和血清都可作為檢測樣...
2014
9-9

大鼠胰島素ELISA試劑盒相關(guān)介紹
胰島素是由胰島B細(xì)胞受內(nèi)源性或外源性物質(zhì)如葡萄糖、乳糖、核糖、精氨酸、胰高血糖素等的刺激而分泌的一種蛋白質(zhì)激素。胰島素是機(jī)體內(nèi)*降低血糖的激素，同時促進(jìn)糖原、脂肪、蛋白質(zhì)合成。大鼠胰島素ELISA試劑盒是一種酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)，應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠胰島素（INS）水平。用純化的大鼠胰島素（INS）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入胰島素（INS），再與HRP標(biāo)記的胰島素（INS）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯...
2014
9-3

探討“ELISA實(shí)驗(yàn)重復(fù)性不佳及出現(xiàn)白板、陽性對照不顯色”
（一）、重復(fù)性不佳可能原因及解決方法？1.樣品數(shù)量多少不一，加樣時間有長有短。重復(fù)某一樣品時，加樣時間盡可能與*次接近2.保溫時間不一致，洗滌條件不一致，操作人員不一致。重復(fù)測定標(biāo)本，操作條件、人員等應(yīng)盡可能與上次保持一致，以排除這些因素造成的不一致的可能性。3.加樣量不一致。樣本稀釋前應(yīng)充分混勻，盡可能使用同一移液器并裝緊吸嘴。。（二）出現(xiàn)白板，陽性對照不顯色可能原因及解決方法？1.顯色液變質(zhì)更換新的顯色液2.洗滌液配置有誤請按說明書所示稀釋倍數(shù)配制。3.未加酶結(jié)合物而認(rèn)為...
2014
9-1

在同一條件下做WB實(shí)驗(yàn)為什么一張膜顯影，一張膜未顯影？
近期恒遠(yuǎn)經(jīng)常接到客戶的：同一條件下，除了測的指標(biāo)不一樣，為什么有張膜顯影，有張未顯影？？？上海恒遠(yuǎn)技術(shù)分析：在同一條件下，如果一張膜顯影，一張膜未顯影，可以逐一查找原因：1、你是否兩張膜上都設(shè)有陽性對照？如果有，一張膜有信號，一張沒信號，可能是操作過程中有問題（可能原因是（1）、你結(jié)合底物會不會有問題，即沒有充分結(jié)合好，或者結(jié)合時間太短，（2）、你要確定兩張膜都是用新的底物反應(yīng)液，（3）、就是沒有信號的膜會不會壓片時間太短，如果使用儀器掃片就不存在這種問題，）所以原因比較多，...
2014
8-18

ELISA實(shí)驗(yàn)加樣步驟不當(dāng)可能會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果及解決方法
ELISA實(shí)驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在臨床跟科研得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個環(huán)節(jié)操作不當(dāng)可能會對實(shí)驗(yàn)的檢測結(jié)果影響較大，如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。現(xiàn)我公司技術(shù)人員將加樣操作中常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以便給同行帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量：加樣可能原因：1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣；2)手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時)；3)加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。解決辦法：1)標(biāo)本為血清：將血液...

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