淺析乙肝血清學檢驗中的三種不常見現象
劉 云
(南京建鄴醫院 江蘇 南京 210017)
【摘要】 目的:通過臨床收集分析乙肝血清學檢驗中的三種不常見現象,探討其影響因素是否與檢測試劑有關,分析產生此類現象的根本原因。方法:收集2009年5月-2012年4月本院的乙肝血清學檢驗樣本,同一個樣本用兩種不同公司的ELISA試劑檢測,根據檢測結果進行統計學分析;根據檢測結果,統計不常見現象的發生率。結果:同一個樣本用兩種不同公司的ELISA試劑檢測,根據檢測結果進行統計學分析,P>0.05,沒有統計學差異。1500例血清樣本中,發生不常見現象者占2%,共30例。結論:ELISA試劑對檢測結果不構成影響,即乙肝血清學檢驗不常見現象與試劑無關;不常見現象多發生于感染乙肝病毒亞型的患者,臨床應在乙肝血清學檢驗的基礎上多做分析,以輔助診斷和治療。
【關鍵詞】 乙肝血清學 不常見 ELISA 乙肝病毒亞型
【中圖分類號】R446.6 【文獻標識碼】B 【文章編號】1672-2523(2012)12-03 76-01
乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)是我國病毒性肝炎患者的主要病因之一,臨床上常用血清學檢測HBV標志物來觀察HBV感染情況。HBV標志物包括HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb,該標志物檢測俗稱乙肝兩對半試驗[1]。人體感染HBV后,血清中抗原、抗體的變化有一 定的規律,有一部分現象是常見的,如HBsAg、HBeAb、HBcAb均呈陽性, 俗稱“大三陽”;不常見現象是相對于這些常見現象而言的。筆者根據本次 臨床研究,主要介紹三種不常見現象,具體匯報如下:
1資料與方法
1.1血清樣本
選擇2009年5月至2012年4月于我院檢驗科檢測乙肝兩對半試驗的血 清樣本1500例,其中,男性836例,女性664例;年齡在10-70歲之間,平均年 齡(34.22±10.26)歲。經統計,患者的年齡、性別對乙肝血清學檢測的常見或者不常見現象無統計學意義,基線資料一致。
1.2檢測試劑
ELISA試劑盒由上海麗臣生物科技有限公司和上海恒遠生物科技有限公司生產,選擇兩種公司同一批號的ELISA試劑盒,以避免試劑造成的偏差。
1.3相關儀器
ELX800酶標儀(BIO-TEK INSTRUMENTS.INC.),LXJ-ⅡB離
心機(上海安亭科學儀器廠)。
1.4方法
1.4.1收集上清液 空腹取上述來我院檢驗科檢測乙肝兩對半患者的靜脈血3-5ml于采血管中,將采好血的采血管置于離心機中,以3000 轉的轉速離心10min。接著輕輕取出已離心好的采血管,防止過大的動作 造成振蕩而使上清液渾濁而廢用,去蓋,用1000ul的移液器吸取上清到1. 5mlEP管中,在EP管上做好相應標記,如患者姓名及日期等,放于-80℃冰 箱,保存待用。
1.4.2ELISA檢測 將收集好的上清液置于同一個實驗室的相同條件下,每一個相同的樣本分別使用上海麗臣生物科技有限公司生產的ELISA 試劑盒(下稱L組)和上海恒遠生物科技有限公司生產的ELISA試劑盒(下 稱H組),嚴格按照各試劑公司的說明書進行操作,并在酶標儀上讀取相關 數據,保存以便分析。
1.5統計學分析
對所有研究數據均采用SPSS18.0軟件進行處理。計量資料的描述以
(±S)表示,計數資料用x2檢驗,配對t檢驗,當P≤0.05認為兩者差異有統計學意義;P>0.05認為兩者差異無統計學意義。
2結果
2.1L組和H組比較
2組配對t檢驗結果顯示,同一個樣本,在L組和H組的ELISA檢測得出的結果相同,無統計學意義P>0.05,說明不同試劑對乙肝血清學檢驗的變異現象無影響。
2.2不常見現象
在我院所選的1500例樣本中,筆者所研究的三種乙肝血清學檢驗不常見現象占2%,共30例,具體見表1。
3討論
乙型肝炎病毒是指由嗜肝的HBV引起的,以肝小葉炎癥和壞死為主 要病理改變的傳染病。HBV血清學分型為gyw-10、gyw-8、gyw-2、golw 及gdw-17等,而感染HBV的同時或者其后感染了亞型,會影響乙肝血清學 檢驗的結果,而出現不常見的現象[2]。通過本研究實驗結果可見,不常見現象與ELISA試劑無關。本臨床研究出現的不常見現象一:HBsAg與HBsAb并存[3],其原因為感染HBV后,在形成充分免疫效應的同時又感染了另類亞型;或者初期感染HBV產生抗體,但對其他亞型不具備防御作用,其后再感 染亞型,造成重疊感染;或者注射乙型肝炎疫苗產生抗體再感染亞型,提示不同亞型的復數感染,一愈一存的現象。不常見現象二:HBsAb與HBeAg并存[3],HBsAb常與HBsAg形成HBsAg/IM,因此,可以為HBsAg消失,而
HbsAb為陽性,多為非典型急性H BV肝炎感染中期。不常見現象三: HbsAb、HBsAg與HBcAb并存[3],感染HBV后HBcAb出現早,它不是保護性抗體,而是感染標志,當這三者并存時,若肝功能異常,則提示感染了HBV亞型。
綜上所述,在依賴實驗室手段檢測出乙肝血清學不常見現象時,除了 進一步分析患者是否感染HBV亞型,還應當詳細詢問患者的病史,以幫助 了解有無亞型感染,為乙型肝炎的診治提供更加完善的證據。
參考文獻
[1]王建中.實驗診斷學[M].北京:北京大學醫學出版社,2010:114-116.
[2]Veronica L Mathet,Maria L Cuestas.Genetic diversity & variability of hepatitis B viru(s HBV)[M].Nova Science Publishers,2008:003.
[3]汪承柏.中西醫結合診治重度黃疸肝病[M].北京市:人民軍醫出版社, 2011:9-18.
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