上海恒遠(yuǎn)與您分享ELISA試劑盒常見問題
更新時間:2016-05-11 點(diǎn)擊次數(shù):1688
上海恒遠(yuǎn)就簡單整理了5個問題,具體內(nèi)容如下:
一、一個ELISA試劑盒檢測幾個樣品?
小編自己在各大論壇看到zui多的三個答案:
1)48T 可做42個樣本加6個標(biāo)準(zhǔn)曲線;96T 可做90個樣本加6個標(biāo)準(zhǔn)曲線
2)以96T試劑盒來算,定量的試劑盒一般可以做90個左右的樣品,定性的試劑盒可以做94個左右的樣品
3)96T的ELISA試劑盒,去除標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)孔檢測,zui多還能檢測80個標(biāo)本;48T的zui多30個樣本。
二、elisa試劑盒96T的能做檢測多少血清樣品?板能重復(fù)利用嗎?
96T,一般做復(fù)孔的話,做標(biāo)準(zhǔn)曲線需要16個孔,剩下80個孔就可以做40個樣本。這個板不能重復(fù)利用。而且配套的試劑也只是夠一塊板子用的。
三、ELISA試劑盒想請教一下,我想用elisa法測血清里的一種抗原,查了資料,發(fā)現(xiàn)沒有現(xiàn)成的試劑盒用,現(xiàn)在就有2種備選方案,一種是買抗體對自己包被(查了R&D等大公司都沒有可用于elisa的單抗)。哪種比較好呢?自己包被的會不會比國產(chǎn)的試劑盒可靠呢?
如果你覺得技術(shù)不錯又對其他公司不放心,可以自己購買抗體對自己包被,這個就是麻煩點(diǎn),自己包被用著放心,舒心;
另外國內(nèi)還是有一些資質(zhì)不錯的公司,如北京達(dá)科為,上海巧伊,依科賽,深圳欣博盛等等
四、western 和ELISA 處理樣本有何差別?
Western Blot 樣品制備要加蛋白裂解液(含有蛋白酶抑制劑),然后冰上研磨,收集于EP管,冰上裂解30min,4度12000rpm離心15min,取上清分裝,即得到蛋白樣品。建議直接電泳,多余的-80保存。ELISA試劑盒建議分裝的蛋白每支略多于一次上樣量,一次性用完一支,避免反復(fù)凍融。
ELISA樣品,直接腦組織冰上勻漿,收集于EP管,同上一樣離心,大約220-250ul每支分裝(因?yàn)镋LISA上樣量基本都是每孔100ul,做復(fù)孔,每個樣品2孔,就需要200ul,為了避免不夠2孔,分裝時要大于200ul每支),直接實(shí)驗(yàn)。多余的-80保存,一樣避免反復(fù)凍融。
不過ELISA少量樣品進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn),或者查閱文獻(xiàn),看看大概組織里有多高濃度,選擇合適的試劑盒,測量范圍要與組織濃度相符。避免濃度過高測量不準(zhǔn),或者濃度過低,小于試劑盒zui低可測濃度。
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