間接ELISA法OD值相差不大有哪些原因?
更新時間:2016-08-02 點擊次數:2506
做間接ELISA法測試小鼠血清中的IgE抗體,設空白對照、和陰性對照、陽性血清稀釋倍數為5千、1萬、10萬、20萬不等,用的是生物素標記的羊抗鼠IgE抗體,和親和素的辣根過氧化物酶。可是結果除了空白對照孔沒有顏色外,其余各孔全有顏色,而且OD值都相差不大,為什么?下面就由恒遠為大家總結出以下幾個原因!
(1) 水質被金屬離子等污染;防止辦法盡量使用新鮮水或蒸餾水。
(2) 洗滌不充分,樣品中其它成分殘留或酶殘留;防止辦法洗滌液應注滿微孔,充分洗滌。
(3) 移液頭重復使用,未洗凈或消毒不*; 防止辦法移液頭一次性使用。
(4) 酶標板靈敏度過高。
(5) 一抗顯色時間的控制等等,關于ELISA的每一步都要注意才行。
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